Тест-система для ускоренной оценки резистентности штаммов Enterococcus faecalis
Научное направление: клинические исследования в микробиологии
3 место
Проект представил: Коменкова Татьяна Сергеевна
Авторы: Коменкова Татьяна Сергеевна
Зайцева Елена Александровна
Научный руководитель: Зайцева Елена Александровна
Организация: Тихоокеанский ГМУ
Актуальность, научная новизна:
В последнее время Enterococcus faecalis все чаще являются причиной нозокомиальных, гнойно-септических и оппортунистических инфекций. Энтерококки способны вызывать эндокардиты, раневые инфекции, неонатальный сепсис, менингиты, инфекции мочеполовой системы (ИМС) [Shrestha L.B., et al., 2019; Weber S., et al., 2019; Zhao-Fleming H.H., 2019]. Рост заболеваемости энтерококковыми инфекциями связывают с различными факторами, в том числе с экспрессий различных факторов патогенности, которые могут инициировать инфекционный процесс. Пластичность энтерококковых геномов позволяют им быстро реагировать и адаптироваться к избирательным ограничениям путем приобретения генетических детерминант, которые увеличивают их способность колонизировать или инфицировать хозяина [Fiore E, et al., 2019].
Полиантибиотикорезистентные энтерококки быстро накапливаются и распространяются в окружающей среде стационара, приводя к экзогенному инфицированию. На сегодняшний день энтерококки являются ведущим этиологическим фактором внутрибольничных инфекций, вызванных грамположительной флорой, после стафилококка [Guzman Prieto A.M., et al., 2016]. Поэтому ускоренная оценка антибиотикорезистентности выделенных энтерококков, позволят не только повысить эффективность антибактериальной терапии, но и отследить энтерококки с множественной лекарственной устойчивостью, что предотвратит распространение резистентности. Применение диагностической панели в формате стрип-полосок позволит уменьшить расход реактивов и сократить время выдачи результата врачу клиницисту, что расширяет возможности диагностики по сравнению с классическими бактериологическими методами.
Научная новизна.
Оценку чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам сегодня осуществляют различными методами:
1) диффузионным (диско-диффузионный и метод градиентной диффузии (Е-тест)),
2) серийных разведений (макрометод и микрометод),
3) использованием хромогенных сред,
4) молекулярно-генетическим и др.
Не смотря на то, что диско-диффузионный метод определения антибиотикочувствительности микроорганизмов является наиболее распространенным, он имеет ряд недостатков, среди которых наиболее значимый – трудоемкость, так как необходимо строго соблюдать условия тестирования и приготовления расходных материалов.
Основной недостаток Е-тестов и хромогенных сред – высокая стоимость исследования для рутинного использования в практике врача бактериолога.
Метод серийных разведений достаточно трудоемок и не имеет широкого применения в практике.
Молекулярно–генетический метод требует наличие специального оборудования и специальной подготовки персонала.
Некачественно выполненные микробиологическое исследование ведет не только к необоснованным материальным затратам, но и самое главное – к нерациональному назначению антибиотиков, ухудшению исхода болезней, увеличению длительности госпитального лечения и стоимости лечения [Решедько Г.К., 2001].
Разрабатываемая тест-система будет представлять собой усовершенствованный метод определения пограничных значений минимальных подавляющих концентраций. Тест-система будет являться ручной системой в формате стрип-полосок для определения чувствительности энтерококков к наиболее значимым антимикробным препаратам, рекомендованных EUCAST. В лунки стрипа будут внесены антибактериальные препараты в двух концентрациях, соответствующих пограничным значениям минимальной подавляющей концентрации и индикатор. Изменение цвета индикатора при росте культуры позволит визуально судить о чувствительности или резистентность исследуемого энтерококка.
Тест-система расширит возможности микробиологической диагностики в выявлении чувствительности энтерококков к основным антимикробным препаратам, используемым для их эрадикации, и проводить мониторинг за распространением резистентности среди энтерококков.
Достоинствами тест-системы будут являться удобство хранения, простота в использовании и утилизации, а также легкость в интерпретации результатов. Применение диагностической панели в формате стрип-полосок позволит уменьшить расход реактивов, снизить рабочую нагрузку и сократить время до выдачи результата лечащему врачу.
Практическая значимость:
Разработанная тест-система для ускоренной оценки антибиотикорезистентности энтерококков повысит эффективность антибактериальной терапии за счет сокращения сроков ее начала и рационального выбора антимикробного препарата. Применение диагностической панели в формате стрип-полосок позволит уменьшить расход реактивов, снизить рабочую нагрузку и сократить время до выдачи результата врачу клиницисту.